MTD 243-670 Manuale Utente Scaricare il pdf (Pagina 81)

6 Diskussion

vermutlich die Methyltransferase MttB (Ferguson & Krzycki, 1997). Die

Demethylierung des TMA führt zum DMA, das weiter zum MMA demethyliert werden

kann. Ob man sich eine ähnliche Kaskade bei der Erschließung des DMSe vorstellen

kann, konnte nicht geklärt werden. Eine Beteiligung an der Erschließung wurde nur

für die Methyltransferase SdmC und dem Corrinoid-Protein SdmA angenommen.

Substratspezifische Methyltransferasen wurden im Genom von M. voltae nicht

gefunden, jedoch weitere, die ebenfalls Sequenzidentitäten mit MtbA, MtsA oder

MtmA aufwiesen. Die substratspezifischen Methyltransferasen sind jedoch nicht

immer erforderlich, wie bei der Demethylierung des DMS gezeigt wurde (Tallant &

Krzycki, 1997; Tallant et al., 2001). Ferner wurde in der vorliegenden Arbeit über ein

Yeast-Two-Hybrid-System nach möglichen Interaktionspartnern zu SdmC gesucht.

Dies scheiterte daran, dass das verwendete System auf M. voltae nicht anwendbar

war. Würde die Erschließung des DMSe in zwei Schritten über das Methanselenol

erfolgen, dann müsste noch ein zweites Corrinoid-Protein-Gen im Genom vorhanden

sein oder aber SdmA wäre der Akzeptor der Methylgruppen beider Substrate.

Ferner wäre es nicht ungewöhnlich, wenn die Methylgruppen des DMSe in M. voltae

zu Methan reduziert werden würden. Beispielsweise wurde Methanbildung bei der

Zugabe von DMSe zu anaeroben Bodenproben beobachtet (Ansede & Yoch, 1997;

Zehr & Oremland, 1986). Die Autoren hatten Hinweise darauf, dass dafür

methylotrophe Methanoarchaeen verantwortlich sein könnten, welche auch das DMS

als Substrat nutzen. Ob diese das DMSe tatsächlich als Selenquelle erschließen,

wurde dort nicht geklärt.

In der vorliegenden Arbeit wurde daher versucht, die Methanbildung

gaschromatographisch bei Zugabe von DMSe zu einer Zellsuspension aus einer

Selenmangelkultur von M. voltae zu messen. Dabei wurde angenommen, dass

Verunreinigungen des DMSe mit anderen Selenverbindungen dazu führen könnte,

dass die Synthese der Proteine SdmA und SdmB bei einer DMSe-Konzentration von

100 µM und darüber inhibiert wäre. Deshalb wurde zu der Zellsuspension das DMSe

zu einer Endkonzentration von nur 10 µM zugegeben und die Zellen mit Wasserstoff

überschichtet und für 24 h inkubiert. Anschließend konnte unter den gewählten

Messbedingungen keine Methanbildung festgestellt und nicht bestätigt werden, dass

die Methylgruppen bei der Erschließung des DMSe in M. voltae zu Methan reduziert

werden.

1 2 ... 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 ... 100 101

Nessun commento

MTD 243-670 Manuale Utente Pagina 81